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為您分析elisa試劑盒定量與定性測(cè)試

更新時(shí)間：2021-04-21   點(diǎn)擊次數(shù)：2082次
　　ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣，尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)由于抗原抗體的反應(yīng)在一種固相載體聚苯Z烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入-種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性在實(shí)際應(yīng)用中通過(guò)不同的設(shè)計(jì)具體的方法步驟可有多種.即用于檢測(cè)抗體的間接法用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法.
　　一ELISA試劑盒定量測(cè)試
　　ELSIA操作步驟復(fù)雜影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致因此在定量測(cè)定中,每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參 考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,.標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)將各濃度的值逐點(diǎn)連接所得曲線一般呈S形其頭 尾部曲線趨于平坦中央較呈直線的部分是理想的檢測(cè)區(qū)域
　　二ELISA試劑盒定性測(cè)試
　　定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出”有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答分別用"陽(yáng)性" "陰性示:陽(yáng)
　　性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng):陰性則為無(wú)反應(yīng)用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度其
　　實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn).在這種半定量 測(cè)定中將標(biāo)本作-系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn)， 呈陽(yáng)性反應(yīng)的稀釋度即為滴度根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性弱陽(yáng)性更具定量意義。